一种基于荧光检测的GST-pull down改进方法的建立及对Atsttrin-TNFR2相互作用的分析
摘 要：创建一种基于荧光检测的GST-pull down 改进方法，用于蛋白质间相互作用分析．利用已确定具有相互作用的Atsttrin和TNFR2蛋白对作为实验对象，分别构建GST-Atsttrin 和TNFR2-EYFP 融合蛋白的原核和真核表达体系．将纯化的GST-Atsttrin 与TNFR2-EYFP 蛋白孵育后，经离心收集复合物，通过酶标仪检测其荧光值，从而分析Atsttrin和TNFR2间的相互作用．通过荧光值的检测成功分析了Atsttrin和TNFR2间的相互作用，荧光值的检测可代替传统方法中的Western blot分析，从而简化GST-pull down分析步骤、降低操作难度、并可对缺乏特异性抗体的靶蛋白进行有效地分析．
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