增加雷斯青霉15α–羟化酶基因拷贝数提高甾体转化效率
摘 要：孕二烯酮是第三代高效避孕药的主要成分．雷斯青霉(Penicillium raistrickii)ATCC10490 催化甾体左旋乙基甾烯双酮的C15α–羟基化反应合成孕二烯酮的重要中间体C15α–羟基左旋乙基甾烯双酮．为了提高现有生产菌种的转化效率，本文研究了在雷斯青霉ATCC10490 中增加甾体C15α–羟化酶基因(PRH)拷贝数对转化效率的影响．分别构建了PRH 基因的诱导型和组成型过表达载体pPZP-p800-PRH 和pPZP-TrpC-PRH，并通过同源重组的方法定点整合到雷斯青霉基因组．转化实验表明，在出发菌株中增加一个PRH 基因拷贝显著提高了甾体左旋乙基甾烯双酮转化效率，重组菌PRH-P800和PRH-TrpC的摩尔转化率分别提高了13%和20%，同时转化时间均缩短了12 h．
论文下载：