一种新型抗菌肽Hydramacin-1 在毕赤酵母中的重组表达、纯化及其抗菌活性
摘 要：Hydramacin-1 是来源于大乳头水螅(Hydra)的上皮防御组织的具有广谱抗菌特性的新型抗菌肽．本研究构建了外泌型重组酵母表达载体pPICZαA-Hydramacin-1，再将线性化的重组表达载体pPICZαA-Hydramacin-1 电转入毕赤酵母宿主菌(Pichia pastoris)GS115 中，成功构建了重组毕赤酵母表达菌株．在培养温度为28℃、甲醇体积分数为1.5%、诱导表达时长为120 h 时，蛋白表达量达到最高，重组抗菌肽Hydramacin-1 的表达量可达83 mg/L．经阳离子交换柱纯化，每升发酵液可得到约9 mg 纯度为90%的重组抗菌肽Hydramacin-1．经最小抑菌浓度的测定，制备的重组抗菌肽具有广谱抗菌特性，相比于革兰氏阳性菌，革兰氏阴性菌对此抗菌肽更为敏感．本实验将Hydramacin-1 抗菌肽首次成功地在毕赤酵母中高效表达，为以后该抗菌肽的理论研究和应用奠定了基础．
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