瑞替普酶在乳酸乳球菌中的表达
摘 要：为建立溶栓药物瑞替普酶(rPA ) 的乳酸菌表达系统，从实验室前期构建的大肠杆菌表达质粒pET22b- rpa 上扩增出目的基因rpa，将该基因与乳酸菌表达质粒pCYT 连接，构建了pCYT- rpa 质粒．此外，为提高rPA 在乳酸乳球菌NZ9000中的稳定性，同时构建了rpa 位于葡萄球菌(Staphylococcal)耐热核酸酶基因nuc 下游融合表达的重组质粒pCYT- nuc-rpa．将质粒pCYT- rpa 和pCYT- nuc- rpa 分别电转化至乳酸乳球菌NZ9000中，经Nisin诱导表达，Western blot 结果显示Nuc 可提高rPA 在乳酸乳球菌中的稳定性，从而增加了rPA 在乳酸菌中的表达量．重组rPA 及Nuc-rPA在复性后均具有溶栓活性，活性分别为800U/L 和1000U/L．
论文下载：