摘 要：利用大肠杆菌（Escherichia coli）表达 Scl2，并通过 Split-GFP 系统建立一种简便快速且可定量检测 Scl2 的方法。结果表明，Scl2 在大肠杆菌（Escherichia coli） BL21 (DE3)中成功表达，并通过 His 亲和标签纯化得到较高纯度的 Scl2。圆二色光谱和差示扫描量热仪分析发现，Scl2 的二级结构和热稳定性与动物源Ⅰ型胶原蛋白相似，并且GFP11 的融合对其几乎没有影响。GFP1-10 和 Scl2-GFP11 结合的前 20 h 显示出较高的结合速度，达到最大荧光强度需要约 70 h。当两者结合 1 h 时，Scl2-GFP11 蛋白浓度与荧光强度之间能够形成较好的线性关系，相关系数 R2 为0.9995，重复性良好。本研究利用 Split-GFP 系统建立了体外检测并定量分析 Scl2 的方法，为下一步高通量筛选研究提供了快速简便的工具。

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基于 Split-GFP 系统定量分析大肠杆菌中异源表达的类胶原蛋白Scl2_色依德·斯马依.pdf

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