不同工艺制备血小板裂解液的稳定性比较研究
摘 要:血小板裂解液(platelet lysate,PL)作为富血小板血浆(PRP)衍生物,已在软组织工程、细胞培养、生殖医学领域被广泛应用,但是目前不同制备工艺和储存条件对 PL 中生长因子活性及稳定性的影响尚未明确。本研究比较了不同工艺制备 PL 的稳定性。采用-80 ℃/37 ℃冻融法、超声处理法和 CaCl2处理法制备 PL,分别于 4 ℃、-20 ℃、 -80 ℃条件下储存 0、7、15、30 d 后,检测总蛋白、血小板衍生生长因子(PDGF)、胰岛素样生长因子(IGF)、转化生长因子(TGF-β)的含量变化。结果显示,不同工艺制备 PL 对总蛋白含量的影响无显著差异,且 PL 中总蛋白在第 30 天的含量显著高于初始水平。生长因子含量随制备工艺和储存温度变化呈现显著差异,其中-80 ℃/37 ℃冻融法制备的 PL 中 PDGF 和 IGF 含量最高,而 TGF-β 的初始含量不受制备工艺的影响。储存温度对 PDGF、IGF、 TGF-β 的含量变化无显著影响,而储存时间是关键影响因素,除超声处理组 PL 中 PDGF 含量随时间延长呈递增趋势外,其余处理组的 PDGF、IGF、TGF-β 在储存至第 7 天时含量均显著降低。因此,上述工艺制备的 PL 储存时间应不超过 7 d。本研究为 PL 中特定生长因子的应用提供了数据支持,为 PL 在组织工程等领域的高效、精准应用提供了理论依据。
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