自噬诱导剂在 HaCaT 角质形成细胞无血清冻存中的保护作用
摘 要:为建立一种低毒、无血清的细胞冻存新方法,探究了天然自噬诱导剂(RSC,由白藜芦醇、亚精胺、咖啡酸组成)复合海藻糖、甘油的冷冻保护剂(CPP)对 HaCaT 角质形成细胞在无血清冻存过程中的保护作用。通过免疫印迹(Western blot)检测 LC3-II、p62 等细胞自噬标志基因的表达变化情况。采用 Cell Counting Kit-8(CCK-8)法与碘化丙啶染色法评估 CPP 对 HaCaT 细胞冻存效果的影响。结果显示:RSC 可有效诱导 HaCaT 细胞自噬,能够增强 HaCaT 细胞自噬流。在无血清、4% DMSO 的冻存液中,CPP 组的细胞复苏存活率与培养活力均显著高于不含CPP 的对照组(P<0.001)。添加 RSC 自噬诱导剂的 CPP 可以有效提升 HaCaT 细胞的低 DMSO、无血清冻存效能,为组织工程及细胞工程中活性细胞的冷冻保存提供了新的策略。
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