真菌β-1,3-D-葡聚糖标准品的制备及分析
摘 要:在侵袭性真菌病的早期诊断中,β-1,3-D-葡聚糖检测(G 试验)的标准品存在水溶性、均匀性差的问题,影响检测的准确性。本研究通过提取茯苓(Poria cocos)β-1,3-D-葡聚糖,羧甲基化修饰成羧甲基茯苓葡聚糖(carboxymethyl Poria cocos β-1,3-D-glucan,CPG),分析其结构,并验证 CPG 标准品的溯源性、不确定度、稳定性等性能。结果显示,CPG 总糖含量达(91.10±2.16)%,主要为以→3)-β-Glcp-(1→连接的葡聚糖。CPG 的红外光谱分析中 1420 cm-1处的伸缩振动峰、核磁共振(NMR)分析中 C1 在 δ 102.43 ppm 处的信号,以及 CPG 水溶性较羧甲基化之前提升 12.6 倍等结果均表明 CPG 羧甲基化修饰成功。CPG 的不确定度低,为 4.83 pg/mL,回收率接近 100%。并且具有良好的稳定性。CPG 具备作为 G 试验标准品的核心特性,为侵袭性真菌感染精准诊断提供可靠物质基础。
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