阪崎克罗诺杆菌基因 clsA 功能及耐干燥机制研究
摘 要:阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii)具有极强的耐干燥性能,但其具体的耐干燥机制尚不清楚。实验室前期使用随机突变库方法筛选出对耐干燥能力影响明显的心磷脂合成酶基因 clsA,为了进一步探索该基因在阪崎克罗诺杆菌耐干燥过程中的作用,通过同源重组方法构建突变株 ΔclsA,并利用载体 pACYC184 构建回补株 cpclsA。比较野生型(WT)、ΔclsA 和 cpclsA 菌株的各种生理特性,发现基因 clsA 缺失会导致菌株心磷脂含量显著降低 38.6%,干燥失活率由(50.73±2.91)%升高至(66.40±3.30)%。实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)及具体代谢物含量分析显示,基因clsA 缺失会导致脯氨酸含量下降 24.0%,甜菜碱含量下降 31.4%,这可能是基因 clsA 缺失导致菌株耐干燥能力下降的主要原因。此外,突变株的运动能力、生物膜形成能力、表面疏水性能也显著降低。本研究有助于进一步阐明 clsA 基因在阪崎克罗诺杆菌耐干燥过程中的功能及机制。
论文下载: