摘  要：本研究以提取纯化的甜杏仁主要过敏原 amandin 为目标物，制备高亲和力的抗 amandin 单克隆抗体。以鼠单克隆抗体为捕获抗体、兔多克隆抗体为检测抗体，通过优化封闭液以及缓冲液 pH 等条件，建立双抗体夹心 ELISA 方法检测 amandin。该方法的检出限为(0.88±0.08)ng/mL，线性范围为 5.86～187.5 ng/mL。该方法与芝麻全蛋白、花生全蛋白、核桃全蛋白以及 β-乳球蛋白均无交叉反应，表明特异性良好。添加回收实验中面包、饼干、巧克力回收率的范围为 82.16%～112.04%，实际样品的检出限分别为(9.07±0.23)ng/mL、(7.78±0.18)ng/mL 和(327.37±0.25)ng/mL，说明能够用于实际样品中 amandin 的准确定量分析。

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