基于辅酶调控产9α-OH-AD 工程菌株构建及其发酵工艺优化
摘 要:利用偶发分枝杆菌(Mycobacterium fortuitum)MFT 降解植物甾醇生产 9α-羟基-雄烯二酮(9α-OH-AD)过程中,存在丙酰辅酶 A 过量积累及辅因子不平衡等问题,影响菌株的转化效率。通过表达 scpC 降低胞内丙酰辅酶 A 含量,并通过串联表达 ndh 解决植物甾醇侧链降解过程中胞内辅因子 I 不平衡的问题,在此基础上表达 AarC 将琥珀酰辅酶 A 和乙酸盐转化为琥珀酸盐和乙酰辅酶 A,增强三羟酸(TCA)循环。构建的重组工程菌株 MFT-scpC-AarC-ndh经初步优化发酵后,9α-OH-AD 产率达到 89.56%,比原始菌株转化率提高了 37.86%。本研究为 9α-OH-AD 的工业化生产提供了理论基础和技术支持,也为其他植物甾醇转化工程菌株的构建提供新策略。
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