长白猪骨髓和脂肪间充质干细胞复制性衰老过程中生物学特性和抗氧化损伤能力的比较
摘 要:为研究对比长白猪骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)和脂肪间充质干细胞(adipose derived mesenchymal stem cells,AMSCs)在体外衰老过程中的生物学特性和抗氧化损伤能力,分别利用贴壁筛选法、Ⅰ型胶原酶消化法分离获得BMSCs 和AMSCs,利用流式细胞术鉴定细胞,EdU 检测细胞增殖能力,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测基因表达,β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)染色检测细胞衰老情况,油红O 和茜素红染色检测细胞的成脂和成骨分化能力,TUNEL 检测细胞的凋亡情况.分离的BMSCs 和AMSCs 均高表达CD44 和CD90,不表达CD45 和CD34.与AMSCs 相比,P8 代BMSCs 增殖能力强,OCT4 和Ki67 表达高,β-gal 阳性细胞数少,成骨分化能力高.但在成脂分化能力方面,AMSCs 强于BMSCs.进一步发现H2O2 处理P8 代细胞时,AMSCs比BMSCs对氧化损伤更敏感,细胞凋亡率显著增加,究其原因可能与抗氧化损伤基因表达的显著降低有关.
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