理性设计降低碱性蛋白酶的胶原降解活力
摘 要:以克劳氏芽胞杆菌来源的碱性蛋白酶(PRO)为研究对象,运用HotSpot Wizard 3.0 设计了PRO 在Gly97-Gly102 loop 区的突变库,筛选得到了胶原蛋白降解活力显著降低的G97E 突变体.G97E 突变体的碱性蛋白酶活力和胶原蛋白降解活力分别为野生型PRO 的91.97%和65.84%;最适温度和最适pH 分别为60 ℃和pH 10.0;其稳定性相比于野生型PRO 无显著差异.综上所述,本研究利用理性设计技术,获得了在碱性蛋白酶活力基本保持不变的情况下,胶原蛋白降解活力显著降低的G97E 突变体,这个新酶品种的开发和工业化生产对于扩大PRO 在皮革工业中的应用具有重要意义.
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