一个黑曲霉细胞色素P450 基因启动子的结构与表征
摘 要：黑曲霉是工业生产上的重要模式菌株，其启动子活性对其生产效率有重要影响；细胞色素P450 是调控菌体能量代谢、细胞生长和各种代谢产物合成的关键酶．通过对细胞色素P450 基因启动子区域(PP450)的克隆、结构分析和功能鉴定，为P450 基因的表达调节研究和P450 启动子的应用提供基础．从黑曲霉基因组克隆出细胞色素P450 基因(An11g01980)的上游片段PP450，连接到pGEM-T 载体进行测序，用启动子分析网站GPMiner 和EMBOSS 分析PP450 片段的启动子功能元件，结果显示：PP450 片段的-864～-106 bp 处有一段长为759 bp 的CpG 区域，含有2 个TATA 盒、6 个CAAT 盒、2 个GC 盒和1 个可能的AmyR 结合位点．构建含PP450 启动子的启动子–报告基因表达载体pPZP-PP450 并转化黑曲霉，通过荧光强度检测启动子功能，结果表明该启动子是一个组成型启动子，但添加沃氏氧化物后启动子表达强度明显增强，推测该启动子区域可能含有沃氏氧化物相关的反应元件或增强子．
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