合成4–羟基异亮氨酸的大肠杆菌构建及其催化体系优化
摘 要：4–羟基异亮氨酸具有血糖水平依赖的促胰岛素分泌特性，是治疗糖尿病的潜在新药．将异亮氨酸羟化酶(isoleucine dioxygenase，IDO)编码基因ido于大肠杆菌(Escherich coli)中表达，获得工程菌株E. coli pET-ido．以该菌株为研究对象，建立和优化了其合成4–羟基异亮氨酸的静息细胞催化体系．结果表明：在最佳条件下(静息细胞27 g/L，L–异亮氨酸250 mmol/L，α–酮戊二酸250 mmol/L，FeSO4 8 mmol/L，VC 6 mmol/L，反应温度35 ℃，pH 9.0)反应12 h，4–羟基异亮氨酸产量和转化率分别达到249.6 mmol/L 和99.8%，较优化前均提高了34.5%和7.5%．这是目前已报道的生物法合成4–羟基异亮氨酸的最高产量，为推动该化合物的微生物合成奠定了良好的基础．
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