hIAPP与麦芽糖结合蛋白的融合表达、纯化和鉴定
摘 要：基于人胰岛淀粉样多肽(hIAPP)的氨基酸序列，按照大肠杆菌(E. coli)密码子偏好性合成基因，并克隆到pMAL-c2x 载体中，与MBP 蛋白malE 基因融合表达，获得重组表达质粒pMAL-hIAPP．将质粒pMAL-hIAPP 转化到表达宿主E. coli BL21(DE3)中，利用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导融合蛋白MBP-hIAPP表达．SDS-PAGE 电泳显示融合蛋白MBP-hIAPP 的相对分子质量约为4.9×104．利用重组型烟草蚀纹病毒的半胱氨酸蛋白酶(rTEV)酶切MBP-hIAPP，并采用凝胶过滤层析的方法分离出高纯度的hIAPP，利用MALDI-TOF 质谱进行了验证．
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