肺炎克雷伯氏菌漆酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的高效表达
摘 要：以肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)基因组为模板，通过PCR扩增得到其漆酶基因lac；基于毕赤酵母密码子偏爱性优化后，得到新型漆酶基因lacm；将其与大肠杆菌–毕赤酵母(E. coli-P. pastoris)穿梭表达载体pPIC9K连接，构建重组质粒pPIC9K-lacm；将该质粒转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115 中，实现该漆酶的胞外分泌表达，发酵液中重组漆酶(rLACM)活力达0.37 U/mL．经对rLACM 酶学性质分析表明：rLACM 的最适温度为70℃，最适pH为8.0，在30～70℃、pH 5.0～9.0 活力稳定．
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