稳定表达TFEB-GFP 细胞系的构建及促TFEB 入核药物筛选
摘 要：本研究旨在构建稳定表达TFEB-GFP 的HeLa 细胞系，并利用其筛选促进转录因子EB(TFEB)入核药物．利用分子生物学技术成功构建了重组表达载体pLVX-AcGFP1-N1-TFEB，并进行慢病毒包装，进而侵染HeLa 细胞，通过嘌呤霉素筛选阳性单克隆细胞株．采用荧光显微镜技术及免疫印迹技术(Western blot)证实稳定表达TFEB-GFP 细胞株构建成功．利用该细胞模型筛选得到促TFEB 入核药物盐酸舍曲林(Sertraline HCl)，此药物能够促进转录因子TFEB 靶基因的表达，并促进细胞自噬．MTT 实验表明Sertraline HCl 抑制肿瘤细胞活力，其对肿瘤细胞的杀伤作用可能是通过其激活自噬引起的．
论文下载：