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肉葡萄球菌电转化条件的优化

张变强,唐巧巧,柯灵超,张 健,王德培,朱 燕,高 强

摘 要:肉葡萄球菌(Staphylococcus carnosus)作为革兰氏阳性菌,遗传转化难度大是限制其遗传操作的主要因素之一.通过优化菌体生长状态、电击缓冲液、复苏培养基组分等条件,分析了各因素对S. carnosus TM300 电转化效率的影响.研究表明:S. carnosus TM300 在B2 生长培养基中生长到A578=0.6 时收集菌体,使用GS 电击缓冲液洗涤菌体制备感受态细胞,在电压2 450 V、间距2 mm 电转杯条件下进行电转化,电击后立即加入LBM 复苏培养基,37 ℃、180 r/min 摇床复苏培养4 h,可以获得的最佳电转化效率为5.95×103 μg-1



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    津科备27-1号