黑曲霉内切葡聚糖酶系的基本酶学特征解析
摘 要:基于黑曲霉(Aspergillus niger)CBS 513.88的基因组信息,以黑曲霉CICIM F0510作为基因来源,本研究成功将其17 个内切葡聚糖酶基因在毕赤酵母(Pichia pastoris)中进行了克隆表达.重组酶En4gA 和En4gG 对羧甲基纤维素钠具有较高酶活力,分别为11.67 U/mL 和7.45 U/mL;而其他重组酶的酶活力为0.83~1.62 U/mL.此外,En3gA、En3gB、En3gC、En4gA 和En4gB 还可以水解茯苓多糖.酶学性质的研究表明,这些重组酶的最适作用温度和最适作用pH 分别为45~65℃、pH 3.5~6.0,且分别在40~80℃和pH 2.0~7.0 具有较好的热稳定性和pH 稳定性.进一步通过底物水解特征、进化树以及碳水化合物活性酶(CAZy)分类系统将这些内切葡聚糖酶分为4 类.良好的耐热性和耐酸
性为这些重组酶在麦芽糖化、饲料颗粒化、纤维素乙醇、食品、纺织以及医药等行业的应用奠定了良好的基础.
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