TMEPAI 蛋白表达对溶酶体稳定性的影响
摘 要:本研究旨在构建稳定表达TMEPAI 细胞株,研究TMEPAI 表达对溶酶体稳定性的影响.采用基因工程技术构建重组表达载体pEF-IRES-TMEPAI-Flag,经酶切、PCR 检测及测序鉴定,证实表达质粒构建正确.将表达质粒转染A549 肺癌细胞,经抗生素puromycin 筛选单克隆阳性细胞株,采用免疫印迹实验(Western blot)和免疫荧光技术证实稳定表达TMEPAI 细胞株构建成功.通过MTT 法、流式细胞技术和吖啶橙染色实验表明,TMEPAI 蛋白能够增强溶酶体的稳定性.
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