摘 要：3–甾酮–9α–羟化酶是转化雄甾–4–烯–3，17–二酮生成9α–羟基雄甾–4–烯–3，17–二酮的关键酶，其加氧酶组分在底物进入酶活性中心入口处，存在一个由16 个氨基酸构成的柔性loop．为了明晰loop 对酶活性的影响，利用定点突变技术对loop 上结构变化较大的氨基酸进行研究，解析出了各氨基酸的作用，T224、N225、Y226 与周围α,5 螺旋和β 折叠存在一定相互作用，共同调节底物通道与底物运送能力；D227 和D228 起到支撑固定loop 结构的作用，使T224–Y226 能与其周围的氨基酸产生相互作用．这为进一步采用蛋白质工程改造9α–羟化酶提供了理论依据．

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