重组人胰岛素原在大肠杆菌中的可溶性表达
摘 要：目前重组胰岛素主要用于糖尿病的治疗．通过大肠杆菌(E. coli)密码子优化，设计人胰岛素原基因，建立利用大肠杆菌表达可溶性重组胰岛素原的技术方法．聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示，重组质粒pHis-NusAinsulin诱导表达的大肠杆菌可溶性表达融合蛋白His-NusA-insulin．重组蛋白His-NusA-insulin 可溶性表达的最适条件为0.1mmol/L IPTG 作用下37℃诱导4h，重组蛋白产物经过Ni 柱纯化、500mmol/L 咪唑洗脱，得到纯度较高的1.059μg/μL 的重组蛋白His-NusA-insulin，重组蛋白His-NusA-insulin 经烟草蚀纹病毒蛋白酶(TEV)酶切作用后，获得可溶的人胰岛素原．
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