摘 要：11α–羟基左旋乙基甾烯双酮(11α-OH-GD)是生产高效避孕药去氧孕烯的关键中间体．丝状真菌赭曲霉(Aspergillus ochraceus)TCCC41060可以转化左旋乙基甾烯双酮(GD)形成11α-OH-GD，但该转化反应特异性低，副产物偏高，限制了其工业应用．为了研究赭曲霉转化GD 特异性偏低的机理，本文克隆了赭曲霉11α–羟化酶基因AOH并构建了表达载体pPIC3.5K-AOH，获得了重组毕赤酵母菌株．聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)与免疫印迹实验(Western blot)分析表明，AOH 重组蛋白相对分子质量为6.12×10⁴，与预测结果一致．对转化产物进行薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)分析结果显示，AOH 重组菌株能够转化GD，形成目标产物11α-OH-GD 以及3 种副产物．以上结果表明：AOH 基因编码的甾体11α–羟化酶对底物GD 转化反应的特异性较差．

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