强光下一氧化氮对三角褐指藻EPA 产量的影响
摘 要:二十碳五烯酸(EPA)是一种长链多不饱和脂肪酸,具有重要的医药价值.本文研究了光照强度和亚硝基铁氰化钠(SNP)分解产生的NO 对三角褐指藻EPA 产量的影响及机理.采用氧电极法探究光照强度与三角褐指藻光合速率的关系,结果显示三角褐指藻的光饱和点为126.3 μmol/(m2·s).采用气相色谱法检测EPA 的含量,结果显示外源NO 可通过促进强光下三角褐指藻的快速生长来提高强光下三角褐指藻EPA 的产量,而对单位生物量中EPA 含量并没有影响;用血球计数板法检测三角褐指藻的生长速率,结果显示在光强200 μmol/(m2·s)时三角褐指藻出现了光抑制,而SNP 能解除这种抑制.探究NO 促进三角褐指藻快速生长的机理,结果显示NO 提高了乙醇酸氧化酶(GO)的活性.用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测外源NO 对GO 基因表达量的影响,结果显示GO 的两个同工酶“GOX和GLY”的基因表达量均增强了.采用AMCA 开关法对纯化的GO 进行S–亚硝基化鉴定,结果显示GOX 和GLY 均发生了S–亚硝基化修饰.分别采用ISNO-AAPair、GPS-SNO 和ISNO-PseAAC 方法预测S–亚硝基化位点,结果显示GLY 的238 位、GOX 的237 位和332 位很可能是NO 的修饰位点.因此,NO 提高GO 活性的途径有两条:提高GO 基因的表达量;对GO 酶蛋白进行S–亚硝基化修饰.综上所述,NO 通过提高GO 活性促进强光下三角褐指藻的快速生长从而提高三角褐指藻EPA的产量.
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