枯草芽胞杆菌谷氨酰胺转氨酶在谷氨酸棒杆菌中的分泌表达及诱导条件的优化
摘 要：本文通过重叠PCR 技术构建获得枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)来源的谷氨酰胺转氨酶(transglutaminase，TG)(BTG)重组基因Sprodbtg，该基因依次包含SD 序列、谷氨酸棒杆菌信号肽ΔS0949 序列、proD-BTG 基因，并将该目的基因克隆入大肠杆菌–谷氨酸棒杆菌穿梭表达载体pXMJ19 中构建重组质粒pXMJ19-Sprodbtg．随后，重组质粒电转入谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)ATCC13032中进行诱导表达，并对重组菌株的诱导条件进行优化．结果表明：重组菌株C. glutamicum ATCC13032/pXMJ19-Sprodbtg 表达重组酶原蛋白proD-BTG 经活化后，BTG 的活力达到(41.23±2.01)U/L；在重组菌培养12 h后诱导、IPTG 终浓度0.8 mmol/L、诱导40 h的最优诱导条件下，BTG的活力达到最高，为(55.62±2.34)U/L，较优化前提高了约 34.90%,．
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