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敲除iclR 基因对大肠杆菌发酵L–色氨酸的影响

陈胜杰,刘 辉,谢希贤,徐庆阳,陈 宁

摘 要:为了研究敲除iclR 基因对大肠杆菌(Escherichia coli)发酵L–色氨酸的影响,以L–色氨酸工程菌大肠杆菌TRTH 为出发菌株,利用Red 重组技术构建了iclR 基因(编码乙醛酸操纵子阻遏蛋白)缺失菌株TRTHΔiclR.摇瓶发酵实验结果显示:TRTHΔiclRL–色氨酸产量和糖酸转化率分别达到(6.52±0.46)g/L 和13.17%,,比原菌的分别提高了21.86%,和22.85%,;乙酸累积量为6.82,g/L,比原菌的降低了37.63%. 30L 发酵罐发酵实验结果显示:TRTHΔiclRL–色氨酸产量及糖酸转化率分别达到(13.01±1.05)g/L 和6.51%,,比原菌的下降了60.34%,和68.27%,;乙酸累积量为18.21g/L,比原菌的增加了33.42%. 结果表明:在摇瓶条件下,重组菌株生物量较出发菌株高,代谢流分配适合L–色氨酸积累;但在发酵罐条件下,乙醛酸循环的增强导致重组菌株供能不足和乙酸的过多积累,最终使得生物量不足以及L–色氨酸产量下降.



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