提高根癌农杆菌介导黑曲霉转化效率的研究
摘 要：为提高根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导黑曲霉(Aspergillus niger)转化(ATMT)效率，本文对影响转化效率的分生孢子与农杆菌的比例、转化媒介、诱导溶氧、诱导时间、诱导时乙酰丁香酮(AS)浓度这5 个因素进行单因素实验，最终确定提高其转化效率的最优条件为：根癌农杆菌诱导过程在400μmol/L 乙酰丁香酮终浓度条件下，100mL 三角瓶中28,℃、100r/min 振荡培养5h，分生孢子与根癌农杆菌的比例为1﹕100，在硝酸纤维膜媒介上24℃共培养48h．在此优化条件下，黑曲霉的转化效率达到35 个/107分生孢子．相比于优化前，转化效率提升了78%,，并且整合至黑曲霉基因组的外源潮霉素B抗性基因在转接15 代以后仍能稳定遗传．
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