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黑曲霉胞外β-葡萄糖苷酶的纯化及酶学性质的研究

徐 星,肖 华,黄琳琳,别松涛

摘 要:利用硫酸铵盐析、Superdex 200 凝胶柱层析等步骤,从黑曲霉发酵液中纯化得到两种β–葡萄糖苷酶蛋白,其相对分子质量分别为1.15×105 和7.0×104 左右,比活力分别为62.1U/mg(相对分子质量约为1.15×105)和53.0U/mg(相对分子质量约为7.0×104),纯化倍数分别为1.54 和1.31,回收率分别为19.6%,和19.1%,β–葡萄糖苷酶最适水解pH 为4.6,最适反应温度为50~55℃.在pH 4.2~4.8、温度40~60℃下均能保持稳定.Mn2+、Mg2+和K+β–葡萄糖苷酶有不同程度的激活作用,而Ca2+、Fe3+、Zn2+、Cu2+和Fe2+会抑制β–葡萄糖苷酶的酶活,Na+和Ba2+β–葡萄糖苷酶活力影响不明显.以pNPG为底物时,该酶的Kmvmax分别为2.33mmol/L与3.14mmol/(L·min).



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    津科备27-1号