假坚强芽孢杆菌丙氨酸脱氢酶的原核表达纯化与结晶
摘 要：丙氨酸脱氢酶(alanine dehydrogenase，Ald)是一种NAD+依赖性的氨基酸脱氢酶，能可逆地催化丙氨酸氧化脱氨生成丙酮酸和氨．实验以假坚强芽孢杆菌的丙氨酸脱氢酶为研究对象，将目的基因克隆到pET-22,b(+)原核表达载体上，并在大肠杆菌中完成蛋白的高效表达．通过镍离子亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析等纯化方法，得到了高纯度的目的蛋白．利用气相扩散法对目的蛋白进行结晶，最终得到分辨率为0.31nm的蛋白晶体．
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