重组质粒pMG36e-nisI-gfp 在乳酸菌中的应用
摘 要:本研究将带有nisI 和gfp(绿色荧光蛋白)基因的乳酸菌表达载体pMG36e-nisI-gfp 转化至乳酸菌中,观察其在宿主内的稳定性.对重组菌进行了菌体形态、传代培养、质粒验证等研究,考察了该质粒的稳定性.结果显示:重组菌在不含抗生素的培养基中连续传代20 代后,质粒丢失率低;菌体大小和形态基本不变;质粒经HindⅢ酶切后大小不变;GFP 在第0、5、10、15 和20 代宿主菌中都可以表达,表达量没有明显差别,在SDS-PAGE 中的带型一致;初步的动物实验验证了该质粒作为遗传标记的应用效果.说明该质粒在宿主菌中具有良好的稳定性.
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