大肠杆菌L-组氨酸生物合成途径的改造及其对工程菌L-组氨酸产量的影响
摘 要：改造大肠杆菌L–组氨酸生物合成途径，以提高L–组氨酸的产量．用NTG 诱变大肠杆菌M-17(SGr)，依次赋予其2–噻唑丙氨酸(2-TA)和组氨酸氧肟酸盐(HisHx)遗传标记，再以突变株M-18(SGr＋2-TAr＋HisHxr)基因组为模板，扩增组氨酸操纵子基因，构建出重组质粒pUC118-his-operon，将重组质粒导入突变株M-18(SGr＋2-TAr＋HisHxr)得到工程菌E. coli M-19(SGr＋2-TAr＋HisHxr/pUC118-his-operon)．根据zwf 和prs 基因序列分别合成引物进行PCR扩增，PCR 产物与载体pSTV28 连接，构建重组质粒pSTV28-zwf、pSTV28-prs 和pSTV28-zwf-prs，将重组质粒分别转化至工程菌E. coli M-19，摇瓶发酵测定重组工程菌L–组氨酸的产量．摇瓶发酵结果显示，L–组氨酸产量与对照株相
比，工程菌E. coli M-19 提高了4.5 倍，双质粒系统重组工程菌E. coli MZH-19、E. coli MPH-19 和E. coli MZPH-19分别提高了5.14、5.78、8.43 倍．
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