摘 要：构建p53 基因RNA 干涉DNA 片段的目的，是将其应用于植物悬浮培养中的细胞周期调节．依据拟南芥p53基因与其他高等植物具有高度保守区域的特点，合成其两个区域的核苷酸片段(Ⅰ和Ⅱ)及其相应的反向片段(Ⅰ′和Ⅱ′ )，并在Ⅱ和Ⅱ′端部分别引入内含子两个端部核苷酸序列．在相互连接后进行PCR 选择扩增，其产物再与克隆载体连接并经过蓝白斑筛选获得重组DNA；在电泳和核苷酸测序鉴定后表明，最终得到了Ⅰ–5′–内含子–Ⅱ′ –Ⅱ–内含子–3′–Ⅰ′序列的重组DNA 片段．该片段两端含多克隆位点，通过插入植物的表达载体进入细胞基因组，在细胞中其转录产物将形成发夹结构，经胞内酶切后可以形成短的双链RNA 片段，将具有干涉p53 基因表达的功能．

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